Apa itu Analisis PCR?
Analisis reaksi polimerase (PCR) adalah teknik laboratorium yang dirancang untuk mengidentifikasi sejumlah kecil DNA dalam sampel dengan proses yang dikenal sebagai amplifikasi . Selama amplifikasi PCR, DNA yang diinginkan disalin berulang-ulang sampai ada cukup untuk analisis dan deteksi. Sebagai contoh, PCR dapat digunakan untuk mengidentifikasi sejumlah kecil DNA dari organisme yang menyebabkan gonore atau klamidia yang ada dalam sampel urin .
Bagaimana cara kerja PCR?
Langkah pertama dalam PCR adalah memanaskan sampel sehingga DNA beruntai ganda memisahkan menjadi dua untai tunggal - ini disebut denaturasi . Kemudian primer , sampel pendek DNA yang sesuai dengan ujung-ujung rangkaian DNA yang diinginkan, digabungkan dengan DNA sampel. Setelah ini, polimerase DNA digunakan untuk memulai replikasi DNA di lokasi primer. Akhirnya, DNA dipanaskan untuk memisahkan untai sekali lagi, dan seluruh proses PCR dimulai lagi.
Jumlah segmen DNA yang diinginkan dalam sampel meningkat secara eksponensial dengan setiap siklus PCR: satu salinan menjadi dua, kemudian menjadi empat, kemudian menjadi delapan, dll; jadi umumnya, hanya 20 hingga 40 siklus yang diperlukan untuk menentukan apakah DNA yang bersangkutan hadir (dan, jika memang demikian, untuk menyediakan sampel yang cukup untuk analisis).
Semua langkah dari reaksi berantai polimerase - denaturasi DNA, menerapkan primer, dan memanjang DNA - terjadi pada temperatur yang berbeda, jadi setelah campuran awal disatukan, langkah-langkahnya dapat dikontrol melalui proses yang dikenal sebagai thermocycling , di mana suhu dipertahankan pada tingkat yang diperlukan cukup lama untuk setiap langkah yang akan dilakukan.
Dengan demikian, PCR adalah cara yang efisien untuk memperkuat jumlah DNA target dalam tabung uji tunggal dengan sedikit kebutuhan untuk campur tangan manusia.
Reaksi berantai polimerase mewakili suatu revolusi dalam teknik biologis ketika pertama kali dikembangkan pada awal tahun 1980, dan pencipta PCR, Kary Mullis, memenangkan Hadiah Nobel dalam Kimia untuk karyanya pada tahun 1993.
Mengapa PCR Relevan dengan Pengujian STD?
Reaksi berantai polimerase, dan teknik terkait seperti reaksi berantai ligase , terbukti menjadi semakin penting untuk pengujian STD. Ini karena teknik ini dapat secara langsung mengidentifikasi sejumlah kecil DNA virus atau RNA dalam sampel. Mengidentifikasi kode genetik dari patogen tidak memerlukan patogen untuk hidup - seperti budaya bakteri atau budaya virus . Ini juga tidak memerlukan infeksi telah terjadi cukup lama yang lalu bagi orang-orang untuk mengembangkan reaksi antibodi yang dapat dideteksi (seperti terdeteksi oleh ELISA .) Ini berarti bahwa teknik PCR kadang-kadang dapat mendeteksi penyakit lebih awal dari tes lainnya, dan tanpa sebanyak perlu khawatir tentang menjaga sampel hidup atau pengujian pada waktu yang tepat.